了解如何消除色谱伪峰

2013-07-31 10:19:03 lhyiqi

色谱伪峰给色谱分析工作带来了极大的干扰和影响。为解决这个问题,首先必须弄清楚产生伪峰的原因。

 

    最简单的情形是所用的流动相在检测波长下有吸收,而进在此波长下没有吸收的溶剂,在流动相中会出现“洞穴”,通过色谱柱后出倒峰。 

 

    至于伪峰产生的原因,可作如下解释:

 

    通常样品(X)和流动相(M)间可能存在两种作用——协同的吸着作用和竞争的吸着作用。

 

    假设样品分子X不可检测(无紫外吸收),流动相组分M可检测。M常是流动相中的杂质,而X可能是溶解样品溶剂中的杂质或组分,或者是真实的样品组分。在协同吸着作用下,如果tM小于tX,流动相组分首先离开柱,则M以倒峰先离开柱,接着X出正峰;如果MX的保留时间相反,即tM大于tX,则X先离开柱出倒峰,后流出的M出正峰。

 

    在离子对色谱中是以协同吸着作用为模式。在反相或正相色谱中是竞争而不是协同,结果引起不同形式的伪峰:先出的伪峰是正峰,后出的伪峰是倒峰。

 

    一旦出现了伪峰,可考虑用下面几种思路予以纠正:

 

    1)用纯试剂作流动相。以高质量的离子对试剂和缓冲物质配制流动相,各类试剂加和起来应产生最小的伪峰效应。

 

    2)用流动相溶解样品。以其它溶剂溶解样品可能产生伪峰或导致伪峰的产生,用流动相溶解样品可减少产生伪峰的几率。

 

    3)进最小体积的样品溶液。伪峰常与样品体积成比例,离子对色谱的进样体积要低于50微升。

 

    4)预处理好样品。样品中的杂质会促成伪峰的出现。

 

      若用上述方法还不能去掉伪峰,则可视作为特殊的干扰峰来处理,即作为特殊的组分。改变色谱条件,使伪峰位置发生变化,避开被干扰的峰。