如何避免HPLC分析中纯水的干扰

2012-03-07 13:40:32 lhyiqi
如何避免HPLC分析中纯水的干扰?
 
为了消除HPLC分析中的干扰,应该遵守以下一些规则:
高纯水应该在用水地点制取而不要放置;
所用的纯水机应该具备塑料组成、作为吸附和离子交换的纯化装置应该为半导体级的质量、应该具备UV-氧化装置和专门设计的过滤器;
水路系统、样品前处理和脱气装置都应在使用前冲洗干净。新装的过滤器应该预先用8~10L水进行冲洗。
每次取水时其前面的50~100ml水应弃之不用。进行样品前处理和脱气过滤时均应按照厂家说明书进行冲洗。玻璃容器应该用薄膜盖住。在400灼烧1h然后用薄膜盖好备用。
除此之外本规则还适用于其他有机分析,包括总有机碳分析(TOC)、近红外分析和GC/MS
 
无论是质谱分析、气相色谱还是高效液相色谱,几乎没有一种分析方法可以不用纯水能够进行的。本文讨论了以下几个问题:水的纯度如何影响HPLC,水中有机物的污染来自何处,为了消除这些影响可以采用哪些技术?
 
水是分析实验室用得最多的试剂,它每天被用来配制缓冲溶液、实验室试剂、校正标准溶液、培养基和样品溶液。特别是高纯水的应用对于任何科学部门无论是科研还是制药或者化妆品以及食品部门,都是不可或缺的。
纯水可以定义为一种不含有任何对实验室分析方法、试剂或者标准有潜在影响的物质。鉴于在无数的方法实验以及在进行包括液相、气相、质谱分析样品制备时均需大量用水,因此纯水的获取便具有决定性的意义。
 
污染对HPLC的影响
 
 
现代分析实验室仪器,例如电感耦合等离子光谱/质谱(ICP/MS)、气相色谱/质谱(GC/MS)、高效液相色谱和荧光分析等的检测限位于ppb-范围或更低。正是由于这样的数值使得遭遇污染的风险更高。水中有机痕量化合物的分析检测日益成为实验室的一大问题,它可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。反相HPLC可以用来对有机物进行鉴定和定量。为保证研究者取得精确的实验结果,必须降低或消除这些有机污染物。
此外,非有机类的污染也可能对实验带来间接性的干扰,对此亦应加以关注。水中污染物,例如无机离子、颗粒物或者溶解气体,可能在样品制备过程中与试剂或溶质发生反应、污染柱子或检测器,降低使用寿命。在采集分析数据时为了取得准确和重现性的测试结果,使用纯水也是最基本的要求。超微量HPLC则对纯水的应用提出了更为苛刻的要求。